1.傳統微生物檢測方法的弊端

傳統的國標檢測方法以微生物培養為基礎進(jìn)行，為了探求快速高效的微生物檢測方法，我們就先來(lái)了解一下傳統的國標法微生物檢測存在的問(wèn)題

1.1 操作復雜

常規的測試需要經(jīng)過(guò)培養基配制、滅菌、倒平板，多級稀釋?zhuān)臃N，培養，計數，分離，鑒定等多個(gè)操作步驟。測試操作復雜，為了獲得準確的測試結果，操作人員的技術(shù)要求會(huì )比較高。

1.2 測試耗時(shí)長(cháng)

最常規的菌落總數培養時(shí)間在48h，這是傳統方法用時(shí)最少的。如果測定大腸菌群等項目，有陽(yáng)性菌出現的話(huà)，整個(gè)測試時(shí)間會(huì )在9天左右。

1.3 耗材量大

基于以上的操作，傳統檢測方法需要消耗大量的培養基，培養品以及其他耗材。同時(shí)培養過(guò)程需要大量不同體積和溫度的培養箱，能源耗費也非常高。

2.微生物快速檢測技術(shù)

相對于傳統檢測方法，快速檢測方法是指從樣品制備到出具檢測結果的整個(gè)檢測過(guò)程能夠在短時(shí)間內完成的檢測方法，包括在樣品制備、實(shí)驗準備、操作過(guò)程中和自動(dòng)化上加以簡(jiǎn)化的方法。

目前，國際上對“短時(shí)間”的共識主要在于三個(gè)方面

1）理化指標的檢測分析在 2 h 內完成

2）應用于現場(chǎng)檢查的能夠在 30 min 內完成

3）與傳統方法相比，能夠縮短 1/2 或1/3 的時(shí)間

微生物快速檢測設備方法主要有以下幾種

2.1 微生物快速測試片技術(shù)

微生物快速測試片由上下兩層薄膜組成，下層的聚乙烯薄膜上印有網(wǎng)格并覆蓋有細菌生長(cháng)所需的培養基，上層為聚乙烯薄膜。使用時(shí)只需揭開(kāi)上層薄膜，接種待測樣品稀釋液于下層培養基，放入培養箱培養計數即可。同時(shí)培養基中預置指示劑使目標菌落顯示特殊的顏色，方便準確判讀。產(chǎn)品包含菌落總數、大腸菌群、霉菌酵母以及多種致病菌的測試片。

2.2 免疫檢測技術(shù)

免疫學(xué)檢測法主要包括免疫層析法、酶免疫檢測法、免疫熒光法等幾種類(lèi)型，應用于食品微生物檢測中的免疫技術(shù)主要是以下2種

1）ATP發(fā)光檢測技術(shù)。這種檢測方式主要是借助ATP 的生物特性來(lái)檢測食品中的各種微生物。其原理是以熒光霉素、熒光素、氧氣為底物，與食品中的微生物發(fā)生相應的化學(xué)反應，從而有效的將化學(xué)能轉化為光能。該方法并不需要對食品微生物進(jìn)行培養，且靈敏度較高。常見(jiàn)的設備是ATP熒光檢測儀，該類(lèi)型檢測儀一般在15秒左右就能得到測試結果。

2）乳膠凝集反應，該反應實(shí)驗現象較為直觀(guān)，通過(guò)肉眼可以直接觀(guān)察。此技術(shù)利用抗原抗體的特異性，向反應體系中加入人工合成的大分子乳膠顆粒，可以有效的直觀(guān)的觀(guān)察到顆粒的凝集反應，根據相應的檢測結果，做好預防工作，降低食品中存在各種有害微生物的概率。這種方法大大縮短了檢測時(shí)間，也減少操作人員培訓時(shí)間和要求。

2.3 分子生物檢測技術(shù)

分子生物學(xué)檢測法中，聚合酶鏈式反應技術(shù)（PCR技術(shù)）和基因芯片技術(shù)最具備代表性。PCR技術(shù)是用于擴增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，可看作是體外DNA復制，PCR的最大特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅擴增。該檢驗方法的主要優(yōu)勢在于特異性高，檢測速度快。

基因芯片技術(shù)立足于分子生物學(xué)與微電子技術(shù)，將基因探針與芯片融合之后，通過(guò)檢測系統掃描芯片，以確定是否存在某些特異狀態(tài)的微生物。理論上看，生物芯片技術(shù)可以在一次實(shí)驗過(guò)程中，檢測出所有的潛在致病原與遺傳學(xué)指標，因此在數據處理和信息提取環(huán)節，應合理分析雜交樣點(diǎn)的定位，避免自動(dòng)識別的結果受芯片影響。

2.4 傳感器快速檢測技術(shù)

目前我國應用于食品微生物檢測中的傳感器技術(shù)主要分為基因傳感器以及生物傳感器。

其中前者主要是借助DNA序列的唯一性來(lái)有效識別食品中的微生物情況?；騻鞲衅髦饕惺⒕w振蕩器等，該檢測技術(shù)所需時(shí)間短，工作效率較高，且實(shí)際操作較為簡(jiǎn)單，最為重要的是該試驗的靈敏度較高。

生物傳感器是區別于前者的一種微生物檢測傳感器，其主要的原理是被測物中的分子與生物接收器上的敏感材料相結合，通過(guò)化學(xué)反應產(chǎn)生一定的物理效應，進(jìn)而通過(guò)離子強度、pH值、顏色變化等進(jìn)行有效的數據分析，檢測出食品中的沙門(mén)菌、金黃色葡萄球菌等。

3.微生物快速檢測設備

基于以上介紹的快檢技術(shù)，目前已經(jīng)有多種快檢設備上市應用

3.1 微生物快檢測試片

雖然測試片法仍然是以培生物培養為基礎的檢測方法，但是它可以大大縮短檢測時(shí)間、減少檢驗人員操作時(shí)間，并具有節省實(shí)驗水電消耗、減少人員操作誤差、替代玻璃器皿減少污染等特點(diǎn)。是受到廣泛認可的微生物快檢方法之一。

3.2 ATP熒光檢測儀

ATP熒光檢測儀具有快速、準確、靈敏、簡(jiǎn)便、可靠等優(yōu)點(diǎn)，能在幾十秒內獲得檢測結果。同時(shí)攜帶方便，適用于現場(chǎng)檢查，快速測試。

3.3 實(shí)時(shí)光電微生物快速檢測儀

實(shí)時(shí)光電微生物快速檢測儀是通過(guò)監控微生物生長(cháng)代謝帶來(lái)的pH值改變及其他生物學(xué)反應來(lái)進(jìn)行檢測盒判斷的。

設備可以有效減少檢測時(shí)間，幫助企業(yè)加快原料和產(chǎn)品的篩選，超限產(chǎn)品提前預警，減少庫存壓力。適用于菌落總數、大腸菌群、霉菌酵母以及多種致病菌的檢測。

3.4 致病菌分子檢測系統

致病菌分子檢測系統技術(shù)是DNA等溫擴增和生物熒光檢測技術(shù)的結合，可以全面提升操作簡(jiǎn)便性，準確性，檢測速度和性?xún)r(jià)比，使致病菌檢測簡(jiǎn)單而純粹。