新國標：化學(xué)分析方法確認和驗證指南，2018年4月1日實(shí)施！

近日，中國質(zhì)檢總局和中國國家標準委員會(huì )發(fā)布了推薦性國家標準GB/T《合格評定 化學(xué)分析方法確認和驗證指南》，標準號：GB/T 27417-2017，并將于2018年4月1日實(shí)施。

隨著(zhù)科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和國際貿易的發(fā)展，國內外對實(shí)驗室化學(xué)分析方法和檢測數據的質(zhì)量提出了更高要求。目前，國外已經(jīng)發(fā)布了一些關(guān)于化學(xué)分析方法的確認規范，但我國尚未發(fā)布關(guān)于化學(xué)分析實(shí)驗室方法確認和驗證的標準和指南性文件，在實(shí)驗室的實(shí)際檢測工作中，經(jīng)常遇到現行的檢測標準無(wú)法與快速發(fā)展的檢測手段相適應的情況。為了提供更準確、高效率的檢測服務(wù)，實(shí)驗室往往需要采用自己制定或改進(jìn)的檢測方法，特別在化學(xué)分析領(lǐng)域，越來(lái)越多的實(shí)驗室使用標準以外的檢測方法，但如何確保這些檢測方法的適宜性和可靠性，一直存在爭議。為此，我國出臺了該標準，是實(shí)驗室對化學(xué)分析方法進(jìn)行確認和方法驗證的指南性文件，旨在提高實(shí)驗室化學(xué)分析方法和檢測數據的質(zhì)量，確?；瘜W(xué)分析實(shí)驗室所提供數據的有效性、公正性和可靠性。

筆者對該規范進(jìn)行了初步總結，以幫助大家快速閱讀和了解該《化學(xué)分析方法確認和驗證指南》，以下是該標準的精簡(jiǎn)介紹和分析。

該國標共有6個(gè)章節，分別是范圍、引用文件、定義、方法確認要求、方法特性參數的確認、方法驗證要求。另外，該國標還有3個(gè)附錄，分別是方法回收率偏差范圍、實(shí)驗室內變異系數、重復性和再現性自由度對照表。

1 范圍

本標準給出了實(shí)驗室對化學(xué)分析方法確認和方法驗證的一般性原則，并指出適用于實(shí)驗室對非標準方法、實(shí)驗室制定的方法、超出預定范圍使用的標準方法以及實(shí)驗室對新引入的分析方法在正式使用前的方法驗證。

2 規范性引用文件

參考了ISO/IEC 指南99:2007國際計量學(xué)詞匯-基本和通用概念及相關(guān)術(shù)語(yǔ)等文件。

3 術(shù)語(yǔ)和定義

本部分對常見(jiàn)的術(shù)語(yǔ)進(jìn)行了定義，包括：方法確認、方法驗證、實(shí)驗室內方法確認、實(shí)驗室間方法確認、定性方法、定量方法、確證方法、篩選方法、容許限、檢出限、定量限、精密度、靈敏度、測量區間、自由度、準確度等。

需要注意的是，該部分中“方法確認”對應的英文是“method validation”，而“方法驗證”對應的英文是“method verification”，大家在閱讀時(shí)還應注意這些和行業(yè)內的常見(jiàn)定義是否有區別。

4 方法確認要求

4.1 總則

實(shí)驗室應對非標準方法、實(shí)驗室制定方法、超出其預定范圍使用的標準方法、擴充和修改過(guò)的標準方法的確認制定程序。對于確認過(guò)的方法，實(shí)驗室應制定作業(yè)指導書(shū)。

4.2 確認方法的特定參數

實(shí)驗室可在綜合考慮成本、風(fēng)險和技術(shù)可行性基礎上，并根據預期的用途來(lái)進(jìn)行方法確認。實(shí)驗室進(jìn)行方法確認的內容應完整，包括但不限于以下方法特性：

a)方法的選擇性;

b)方法適用范圍;

c)檢出限和/或定量限;

d)測量范圍和/或線(xiàn)性范圍;

e)精密度(重復性和/或再現性);

f)穩健度;

g)正確度;

h)準確度;(注：測量結果的準確度由正確度和精密度兩個(gè)指標進(jìn)行表征。)

i)靈敏度;

j)結果的測量不確定度。

4.3 確認方法特性參數的選擇

4.3.1 方法確認的典型特性參數

方法確認首先應明確檢測對象特定的需求，包括樣品的特性、數量等，并應滿(mǎn)足客戶(hù)的特殊需要，同時(shí)應根據方法的預定用途，選擇需要確認的方法特征參數。

典型方法確認參數的選擇，參見(jiàn)表1：

4.3.2 實(shí)驗室內方法確認

通常情況下，需要確認的技術(shù)參數包括方法的選擇性、檢出限、定量限、線(xiàn)性范圍、正確度、精密度和穩健度等。

4.3.3 實(shí)驗室間方法確認

通常情況下，對于定性方法，至少應確認方法的檢出限和選擇性;對于定量方法，至少應確認方法的適用對象、線(xiàn)性范圍、定量限和精密度。

5 方法特性參數的確認

5.1 選擇性

分析方法應具有一定的選擇性。

5.2 測量范圍

方法的測量范圍通常應滿(mǎn)足以下條件：

a)方法的測量范圍應覆蓋方法的最低濃度水平(定量限)和關(guān)注濃度水平;

b)至少需要確認方法測量范圍的最低濃度水平(定量限)、關(guān)注濃度水平和最高濃度水平的正確度和精密度，必要時(shí)可增加確認濃度水平。

c)若方法的測量范圍呈線(xiàn)性，還應滿(mǎn)足5.3條款的要求。

5.3 線(xiàn)性范圍

線(xiàn)性范圍應盡量滿(mǎn)足如下標準：

a)采用校準曲線(xiàn)法定量，并至少具有6個(gè)校準點(diǎn)(包括空白)，濃度范圍盡可能覆蓋一個(gè)或多個(gè)數量級，每個(gè)校準點(diǎn)至少隨機順序重復測量2次，最好是3次或更多;對于篩選方法，線(xiàn)性回歸方程的相關(guān)系數不低于0.98;對于準確定量的方法，線(xiàn)性回歸方程的相關(guān)系數不低于0.99.

b)校準用的標準點(diǎn)應盡可能均勻地分布在關(guān)注的濃度范圍并能覆蓋該范圍?

c)濃度范圍一般應覆蓋關(guān)注濃度的50%~150%，如需做空白時(shí)，則應覆蓋關(guān)注濃度的0%~150%。

d)應充分考慮可能的基質(zhì)效應影響，排除其對校準曲線(xiàn)的干擾。

5.4 檢出限和定量限

5.4.1 需要評估檢出限(LOD)和定量限(LOQ)的情況

通常情況下，只有當目標分析物的含量接近于“零”的情況下或者檢測濃度接近檢出限和定量限時(shí)，才需要確定方法的LOD或LOQ。

5.4.2 檢出限(LOD)

對于多數現代分析方法來(lái)說(shuō)，LOD可分為兩個(gè)部分，即儀器檢出限(IDL)和分析方法檢出限(MDL)。應注意兩者的區別，在該國標中指出：使用信噪比可用來(lái)考察儀器性能，但不適用于評估方法的檢出限。

確定檢出限的方法：

在該國標中提到了多種確定檢出限的方法，包括：

a)目視評價(jià)法評估LOD

目視評價(jià)法是通過(guò)在樣品空白中添加已知濃度的分析物，然后確定能夠可靠檢測出分析物最低濃度值的方法。即在樣品空白中加入一系列不同濃度的分析物，隨機對每一個(gè)濃度點(diǎn)進(jìn)行約7次獨立測試，通過(guò)繪制陽(yáng)性(或陰性)結果百分比與濃度相對應的反應曲線(xiàn)確定閾值濃度。該方法也可用于定性方法中檢出限的確定。

b)空白標準偏差法評估LOD

即通過(guò)分析大量的樣品空白或加入最低可接受濃度的樣品空白來(lái)確定LOD。獨立測試的次數應不少于10次(n≥10)，計算出檢測結果的標準偏差，具體的計算方法可參考該國標。

5.4.3 定量限(LOQ)

與檢出限相類(lèi)似，定量限也分為儀器定量限和分析方法定量限。

5.5 正確度

測量結果的正確度用于表述無(wú)窮多次重復性測定結果的平均值與參考值之間的接近程度，測量結果的偏倚則通過(guò)回收率實(shí)驗進(jìn)行評估。

5.6 精密度

該國標中對精密度的描述分別從重復性、再現性?xún)蓚€(gè)維度進(jìn)行描述。

5.7 穩健度

穩健度可通過(guò)由實(shí)驗室引入預先設計好的微小的合理變化因素，并分析其影響而得出?？蓪悠愤M(jìn)行預處理、凈化、分析等可能影響檢測結果的方面進(jìn)行預實(shí)驗，并分析可能影響結果的因素，必要時(shí)進(jìn)行正交試驗設計進(jìn)行穩健度試驗。

5.8 測量不確定度

該國標中列舉了可能影響不確定度的多方面因素，并對測量不確定度評估時(shí)的考慮要點(diǎn)進(jìn)行了介紹。

6 方法驗證要求

對分析方法的驗證提出總體要求，包括定量分析和定性分析。在驗證總則中提到，當化學(xué)分析實(shí)驗室引入標準方法時(shí)，實(shí)驗室應根據該國標的相應要求進(jìn)行驗證，即證實(shí)該方法能在該實(shí)驗室現有的設施設備、人員、環(huán)境等條件下獲得令人滿(mǎn)意的結果。

說(shuō)明：本文僅是對國標《合格評定 分析方法確認和驗證指南》GB/T 27417-2017 的部分節選和介紹，僅供參考，若需獲得更多準確內容還請查看國標。